哺乳动物细胞表达系统在生物技术领域展现出显著的优势
1. 能够进行复杂的翻译后修饰，并确保蛋白质正确折叠和复性；
2. 表达效率高，能够产生大量的目标蛋白；
3. 高效的启动子能够精确控制蛋白质的表达水平；
4. 适合进行大规模的蛋白质生产。
艾伯森生物提供全面的蛋白技术服务，包括表达载体的构建、瞬时转染、表达测试以及大规模的动物细胞发酵和蛋白质纯化。
我们提供的表达载体包括pcDNA 3.1，pIRES，pTT3，pCEP4，pATX1等常规载体，以及我们分子技术人员自行设计和改造的专利性载体。
1. 载体构建及改进
1) 可以将客户的cDNA克隆到哺乳细胞表达载体中，或者使用我们提供的载体；
2) 在表达载体中添加分泌信号肽和纯化标签，以促进蛋白质的分泌表达，并满足一步亲和纯化的需求；
3) 能够生产并鉴定高效稳定的细胞系，适合大规模发酵生产。
2. 稳定基因表达符合长期生存需求。整个实验操作流程提供长期稳定且规模可调的蛋白质生产
3. 瞬时表达（TGE）
1) 与稳定基因表达相比，瞬时表达主要适用于短期内制备重组蛋白，通常在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择；
2) 艾伯森生物的瞬时表达使用悬浮细胞，能够完成体积到100L的蛋白质表达。
4. 工艺过程开发及扩大规模。艾伯森生物能够优化表达过程以及表达产物，检测细胞表达量，摸索发酵罐发酵条件，适合大规模发酵生产。
5. 纯化。艾伯森生物拥有完整的蛋白质纯化系统，包括亲和纯化、凝胶过滤、离子交换及疏水层析等纯化方法，能够完成带标签与不带标签蛋白质的纯化，以及纯化工艺的摸索。
某生物细胞器基质蛋白，全长334aa，大小37.03kDa，自带Fc标签蛋白，采用293F细胞表达。我们在对其编码基因进行全密码子优化后，把它构建到pTT3载体上，测序验证无误后，进行了30ml体积试表达，如Figure1：
Figure 1. Expression result .Coomassieblue staining.
MW. Molecular weight marker.Ø. Non-transfected (negative control).
目的蛋白的最大回收率，我们先后对Flowthrough进行了两次Protein G纯化（Figure2~Figure3），可以看到在第二次纯化后，FT中尚残留的目的蛋白。
Figure2. Target protein purification profile.
Figure 3. Target proteinpurification profile.Reducing-PAGE analysis.
为此我们提高了盐浓度至300mMNaCl，这次洗脱后，FT中剩余的蛋白量显著降低，如Figure4.
Figure 5. Target protein purificationprofile. Coomassie blue staining.Reducing-PAGEanalysis.
再是表达摸索清楚成熟的实验条件后，我们进入大体积制备，2L发酵。
Figure 6. Target protein purification profile and QC gel.